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篇1:基于固定化AChE的流动注射型酶传感器研究
基于固定化AChE的流动注射型酶传感器研究
摘要:以固定化鲅鱼脑组织乙酰胆碱酯酶[acetylcholinesterase,AChE(EC 3.1.1.7)]为识别元件,以pH电极为换能器,构建流动注射型AChE酶传感器.该传感器在以磷酸盐缓冲液为载液的条件下具有良好的重现性(RSD=1.427%,n=10)和敏感性,可实现对有机磷化合物的在线监测;对甲基对硫磷具有线性响应的浓度范围为4.29×10-10~4.29×10-8mol・L-1,最低检测限为1.3 × 10-10mol・L-1.在以清洁海水为载液条件下,该传感器对海水中甲基对硫磷的.敏感性较差,但是采用NaClO溶液对海水中甲基对硫磷进行预氧化后,传感器对其的最低检测限可达到2.16×10-7mol・L-1.作 者:朱小山 孟范平 朱琳 何东海 ZHU Xiao-shan MENG Fan-ping ZHU Lin HE Dong-hai 作者单位:朱小山,朱琳,ZHU Xiao-shan,ZHU Lin(南开大学环境科学与工程学院,天津,300071)孟范平,何东海,MENG Fan-ping,HE Dong-hai(中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003)
期 刊:环境科学 ISTICPKU Journal:CHINESE JOURNAL OF ENVIRONMENTAL SCIENCE 年,卷(期):, 27(9) 分类号:X834 关键词:固定化 乙酰胆碱酯酶 生物传感器 流动注射系统 有机磷农药篇2:食品业固定化酶作用论文
食品业固定化酶作用论文
1.固定化酶的定义与特点
固定化酶技术是将酶用人工方法固定在特定载体上,进行催化、生产,因而固定化酶一般可以被认为是不溶性酶。与水溶性酶相比,其优点如下:易于将固定化酶与底物、产物分高,便于后续的分离和纯化;可以在较长时间内连续生产;酶的稳定性和最适温度提高;酶反应条件容易控制;可以增加产物的收率,提高产物质量;酶的使用效率高,使用成本低;适于产业化、连续化、自动化生产。与此同时,由于酶的分离、固定化处理等原因,固定化酶也具有一些难以避免的缺点:在固定化过程中,酶活力会损失;生产成本提高,工厂初期投资大;只能用于水溶性底物,适合于小分子;不适宜于多酶反应,还需要需要辅助因子的协助才可以有效反应。
2.固定化酶在食品工业上的应用
2.1固定化酶在柑橘汁加工中的应用
柑桔加工产品出现过度苦味是柑桔加工业中较重要的问题,苦味物质主要由2类物质组成:一类为柠檬苦素的二萜烯二内酯化合物(A和D环);另一类为果实中多种黄酮苷,其中柚皮苷为葡萄柚和苦橙等柑桔类果汁中的主要黄酮苷,柚皮苷的苦味与鼠李糖和葡萄糖连接键的分子构象有关。主要是利用不同的酶分别作用于柠檬苦素和柚皮苷生成不含苦味的物质。Manjon等使用空心玻璃床作为载体,分别使DEAE-Sephadex和单宁-氨基乙基纤维(tanninaminoethy1cellulose)作为载体;Puri等使用海藻糖;Soures等使用醋酸纤维和三醋酸纤维制成膜固定酶,其试验结果都表明用固定化酶处理后的果汁苦味明显降低。
2.2固定化酶在啤酒澄清中的应用
啤酒以其清晰度高、泡沫适中、营养丰富和口感好成为人们的最佳选择。但是,由于啤酒中含有一定量的蛋白质,它与游离于啤酒中的多酚、单宁等结合产生不溶性胶体或沉淀,造成啤酒混浊,从而严重影响了啤酒的质量。
2.3固定化酶在乳制品中的应用
乳糖酶亦称为β-半乳糖苷酶,是工业中应用相当广泛的一种酶,较多地应用于乳制品加工中。很多人小肠黏膜内的乳糖酶活性严重降低,导致乳糖不耐受症。用乳糖酶处理部分乳糖,分解为葡萄糖和半乳糖,可以减少这种症状。
2.4固定化酶在制糖中的应用
在制备低聚果糖中,Hayashi等用多孔硅石吸附Aureo-basidiumsp.的果糖基转移酶,并用戊二醛交联后装柱可保留较高的酶活力。Hayashi等用DEAE-纤维素固定果糖基转移酶,酶活力可保留95%。Yun等将果糖基转移酶固定在苯乙烯衍生的多孔离子交换剂上填入玻璃柱内,初始固定化酶的活性仅丧失8%。Chiang等将Aspergillusniger和Aspergillusjapoicus的果糖基转移酶纯化后共价结合在甲基丙烯酰胺高分子颗粒上,可保留酶活力达100%。固定化葡萄糖异构酶可以用来催化玉米糖浆和淀粉生产高甜度的高果糖糖浆。用淀粉生产高果糖浆包含3步:一是用淀粉酶液化淀粉;二是用糖化酶将其转化为葡萄糖,即糖化;三是用葡萄糖异构酶将葡萄糖异构为果糖。由此可得到含高果糖浆与蔗糖同等甜度时,其价格低10%~20%,具有经济推动力。该固定化酶常用的制备技术是热处理法,将含葡萄糖异构酶的放线菌、芽孢杆菌或链霉菌等细胞用60~65℃热处理15min,该酶就固定在菌体上制成固定化酶。
2.5固定化酶在茶叶加工中的应用
在茶叶中含有种类繁多的酶,如多酚氧化酶、过氧化酶、单宁酶、果胶酶等,其对茶叶的加工或深加工有重要的意义。对重要酶类的固定化研究,可有效地改善茶叶的品质、拓展茶叶深加工的领域和应用范围。
2.6固定化酶在烟叶中的应用
在烤烟初烤和复烤后尚残留淀粉,淀粉在燃吸时影响燃烧速度和燃烧完全性,并产生糊焦气味,影响吸食品质。在一定条件下淀粉能水解为水溶性糖,使烟质改善。但这些反应并不充分,处理后的烟叶中淀粉含量仍很高,特别是低次烟叶中较高的淀粉含量影响了该类烟叶的可用性。加酶处理能加速淀粉水解,能将直链淀粉迅速降解为糊精和麦芽糖等,糖化酶能将直链淀粉和支链淀粉降解为葡萄糖。
2.7固定化酶在食品检测以及传感器中的应用
生物传感器被认为是一种由受体、抗体或酶构成的生物感应层于换能器紧密连接而能提供环境组成信息的'感应器。如:测量电流以及电位的酶电极,酶热敏电阻装置,以场效应管为基础的生物传感器,以及生物发光及化学发光为基础的纤维—光学传感器等,不同的传感器都应用不同类型的固定化酶。食品中的农药残留分析越来越受到人们的关注,蔬菜中有机磷农药残留的快速检测已成为目前人们研究的热点。应用有机磷农药对胆碱酯酶特异性抑制的酶化学比色分析法已被广泛应用于有机磷农药的定性、定量检测。
3.固定化技术在食品工业中应用的前景和发展
固定化技术在食品工业中的应用还很多,如固定化氨基酰化酶生产L-谷氨酸;固定淀粉酶和葡萄糖淀粉酶以淀粉为原料生产葡萄糖;固定化酶法酿造调味品等,但用于食品工业的酶远远大于固定化酶。还有很多固定化酶和固定化细胞处于中试阶段,固定化原生质克服了固定化细胞的一些缺陷,但固定原生质体还处于研究之中,未用于生产。人们清楚地看到了固定化技术的一些优点,虽然很多还处于研究和开发中,但已经给人们指明发展方向。随着固定化技术的发展,将会有更多的固定化酶、细胞、原生质体应用于生产中,充分显示出固定化技术的优越性,开启固定化技术的新局面。
篇3:固定化酶复台材料及其制备方法的研究
固定化酶复台材料及其制备方法的研究
本文研究并提供了一种用于污染水源修复的固定化酶复合材料的.配方及其制备方法,制备方法简单,造价低,效果好,该材料可广泛应用于污、废水的处理工程,是一种经济实用、发展前景广阔的新型环保材料,具有综合交叉学科集成创新的特点.
作 者:孙祥章 敖小平林祥进 SUN Xiang-zhang AO Xiao-ping LIN Xiang-jin 作者单位:福州晨翔环保工程有限公司,福州,350002 刊 名:中国环保产业 英文刊名:CHINA ENVIRONMENTAL PROTECTION INDUSTRY 年,卷(期): “”(11) 分类号:X703 关键词:固定化酶 复合材料 制备方法篇4:醋酸纤维素固定化酰化酶膜的研究
醋酸纤维素固定化酰化酶膜的研究
采用正交实验法,考察了铸膜液配比对醋酸纤维素固定化氨基酰化酶微孔滤膜的影响,对酶膜的泡点压力、孔径、孔隙率及透水速率等性能进行了表征.结果表明,铸膜液组合最佳时,酶相对活力产率高达98.2%,酶膜的透水率适当,重复使用10次后仍保留原活力的`79.7%,而其存放稳定性也大大提高.
作 者:郭永胜 王杰 董军 宋锡谨 作者单位:浙江大学化学系杭州310028 刊 名:生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU英文刊名:PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年,卷(期): 28(5) 分类号:Q55 关键词:醋酸纤维素 固定化 氨基酰化酶 膜性能篇5:固定化乳糖酶的研究
固定化乳糖酶的研究
用明胶作为固定化乳糖酶的载体,研究比较载体的用量、交联剂的浓度,用酶量、制备的pH值.结果表明,选择150 g/L质量浓度的明胶为载体,体积分数为0.5%的戊二醛为交联剂,用酶量为0.5 g/L,在pH值为7.2,混和搅拌时间为3 min的条件下制备固定化果胶酶,其酶活力回收率可达78 12%,重复回收使用7次后,酶活力还可以保留75%以上,是乳糖酶固定化的'一种较好的方法.
作 者:潘晓亚 马力 周黎黎 PAN Xiao-ya MA Li ZHOU Li-li 作者单位:西华大学,生物工程学院,四川,成都,610039 刊 名:中国乳品工业 ISTIC PKU英文刊名:CHINA DAIRY INDUSTRY 年,卷(期): 34(3) 分类号:Q814.2 关键词:乳糖酶 固定化 明胶篇6:壳聚糖固定化醇脱氢酶的制备及其酶学性质研究
壳聚糖固定化醇脱氢酶的制备及其酶学性质研究
报道了醇脱氢酶(ADH)的固定化和酶学性质研究.以壳聚糖作为载体,戊二醛作为交联剂.固定化ADH的最适条件为:以6%戊二醛将壳聚糖交联2 h,与ADH反应2.5 h.对游离和固定化ADH酶学性质的研究表明:酶促反应的最适pH均为8.2,最适温度分别为37℃和40℃,对乙醇的'表观米氏常数Km分别为33.9 mmol/L和46.2 mmol/L.与游离酶相比,固定化酶具有良好的操作稳定性.
作 者:庹浔 何秋蔚 柳畅先 TUO Xun HE Qiu-wei LIU Chang-xian 作者单位:中南民族大学化学与材料科学学院,分析化学国家民委重点实验室,武汉,430074 刊 名:分析科学学报 ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF ANALYTICAL SCIENCE 年,卷(期): 23(6) 分类号:O652 关键词:壳聚糖 醇脱氢酶 固定化 酶学性质篇7:改性与修饰壳聚糖固定化酶纯化抑肽酶研究
改性与修饰壳聚糖固定化酶纯化抑肽酶研究
采用化学改性与修饰微珠壳聚糖为载体,共价法偶联牛胰蛋白酶,制成抑肽酶亲和吸附剂,单位活力5190 KIU/g(湿),蛋白质偶联率60.5%,酶活性回收率55%;将其直接亲和层析牛肺提取液,分离纯化高比活抑肽酶.方法过程简单,样品比活力5700 KIU/mg,质量稳定,成本较低;该吸附剂机械强度高,抗污染能力较强,非特异性吸附较小,可以反复使用,价格低廉,适合工业化生产.
作 者:宋扬 侯司 赵辉 王荣海 吴中华 SONG Yang HOU Si ZHAO Hui WANG Rong-Hai WU Zhong-Hua 作者单位:安徽省生物研究所,合肥,230031 刊 名:生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU英文刊名:PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年,卷(期): 27(1) 分类号:Q814 关键词:固定化酶 亲和层析 抑肽酶 壳聚糖篇8:低分子醇的流动注射双安培传感器
低分子醇的流动注射双安培传感器
基于不可逆电对的双安培检测原理,设计了快速检测低分子醇的流动注射双安培传感器。该传感器由一支表面修饰有氧化铂的铂电极和一支洁净的铂电极构成,通过偶合一支电极上低分子醇的'吸附氧化和另一支电极上氧化铂的还原两个不可逆电对,构建了双安培检测体系。在外加电位差为0.00 V时,甲醇、乙醇、乙二醇、正丙醇、丙三醇的吸附氧化电流与其浓度分别在0.01~8?00、0.01 ~8? 00、0.01~8?00、0.01~4?00、0.01~4.00 mol/L范围内呈线性关系;检出限分别为0.0 03、0.003、0.001、0.006、0.006 mol/L (S/N=2)。该传感器具有结构简单、选择性好、效率高(180样/h)等优点,已成功应用于啤酒中乙醇的直接测定。
作 者:赵川 张君才 宋俊峰 作者单位:西北大学分析科学研究所,西安,710069 刊 名:分析化学 ISTIC SCI PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY 年,卷(期): 30(6) 分类号:O65 关键词:低分子醇 乙醇 啤酒 流动注射分析 双安培法 电化学传感器篇9:砷(Ⅲ)的流动注射化学发光分析方法研究
砷(Ⅲ)的流动注射化学发光分析方法研究
酸性条件下高锰酸钾氧化As(Ⅲ)产生化学发光,六偏磷酸钠与甲醛对该体系有显著的增强作用,据此建立了流动注射化学发光法测定水中砷的新方法.在优化的'实验条件下,As(Ⅲ)浓度在0.002~0.3 μg/mL范围内与发光强度呈良好的线性关系,检出限为0.001 μg/mL.对0.1μg/mL As(Ⅲ)标准溶液进行11次平行测定,相对标准偏差为2.1%.将本法应用于水样中砷的测定,结果令人满意.
作 者:刘杨 黄玉明 LIU Yang HUANG Yu-ming 作者单位:刘杨,LIU Yang(西南大学,化学化工学院,重庆,400715)黄玉明,HUANG Yu-ming(三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆,400715)
刊 名:西南大学学报(自然科学版) ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF SOUTHWEST UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 29(5) 分类号:O653 关键词:流动注射 化学发光 砷 高锰酸钾篇10:毛细管柱固定抗原流动注射化学发光免疫法测定IgG
毛细管柱固定抗原流动注射化学发光免疫法测定IgG
目的 建立基于毛细管柱固定抗原流动注射增强化学发光免疫法测定IgG分析的新方法.方法 以辣根过氧化物酶(HRp)标记抗IgG与抗IgG竞争毛细管内壁表面固定的IgG抗原,利用HRP催化对鲁米诺-过氧化氢-对碘苯酚体系的`增强化学发光,建立测定IgG的流动注射化学发光免疫分析方法.结果 在选定的实验条件下,化学发光信号与IgG在稀释比为1∶1×1011~1∶1×1010间成良好的线性关系,相关系数为0.996 0.对稀释比为1∶5×1010IgG抗体连续11次测定的相对标准偏差为6.5%.结论 将该法应用于合成血清样品中IgG抗体的测定,结果满意.
作 者:李晓霞 李延清 申丽华 漆红兰 LI Xiao-xia LI Yan-qing SHEN Li-hua QI Hong-lan 作者单位:李晓霞,LI Xiao-xia(陕西师范大学,化学与材料科学学院,陕西,西安,710062;延安大学,化学与化工学院,陕西,延安,716000)李延清,LI Yan-qing(延安大学,化学与化工学院,陕西,延安,716000)
申丽华,漆红兰,SHEN Li-hua,QI Hong-lan(陕西师范大学,化学与材料科学学院,陕西,西安,710062)
刊 名:西北大学学报(自然科学版) ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF NORTHWEST UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期):2007 37(6) 分类号:O657.3 关键词:流动注射分析 免疫分析 化学发光 毛细管柱 IgG